Comment Observer En Immersion Au Microscope?
Objectif à immersion
Cette séquence vidéo présente une description commentée des manipulations de l’objectif à immersion d’un microscope.
L’objectif est dit « à immersion » parce qu’il doit être immergé dans une huile spéciale qui a le même indice de réfraction que le verre.
La présence de cette huile permet un grossissement de 1000x.
Il n’y a que l’objectif 100x qui peut être utilisé avec de l’huile à immersion.
La séquence vidéo montre aussi les précautions qui doivent être prises afin d’éviter d’endommager les autres objectifs.

Préparer la lame
L’observation de matériel microscopique exige quelques préparatifs. Il faut entre autres préparer la lame sur laquelle on déposera l'objet à observer au microscope.
- Nettoyer délicatement la lame de verre à l’aide de papier à lentille.
- Déposer le matériel à observer au centre de la lame à l’aide d’une pince.
- Déposer une goutte d’eau ou de colorant sur le matériel à observer.
- Recouvrir délicatement la préparation à l’aide d’une lamelle en évitant la formation de bulles d’air. Pour ce faire, appuyer à la verticale la lamelle puis la pencher afin de la coucher sur la préparation.
- Au besoin, retirer l’excès d’eau ou de colorant en approchant un papier absorbant près de la lamelle.
Une fois la préparation refermée avec la deuxième lamelle, utiliser les pinces pour stabiliser votre scène d’observation.

Installer la lame et choisir l’objectif
- Brancher le fil électrique du microscope dans une prise de courant.
- Nettoyer délicatement l’oculaire et les objectifs à l’aide de papier à lentille prévu à cette fin.
- Tourner la vis macrométrique afin de baisser la platine au maximum.
- Mettre délicatement en place la lame en ouvrant les valets, s'ils sont présents.
- Une fois la lame installée, refermer les valets pour la maintenir en place.
- Tourner la tourelle afin que l’objectif du plus petit grossissement soit devant l’orifice de la platine.
Il faut s’assurer que l’objectif est bien aligné. Lorsqu'un clic sera produit par l'objectif, ceci signifie que l'objectif est bien placé et que l'on peut débuter l'observation.
Dès lors, l’objectif le plus bas est toujours celui qui est le plus éloigné de la diapositive. Il faut donc toujours commencer avec cet objectif.

Mise au point et grossissement
- Vis macrométrique
- Permet de faire une mise au point grossière de l'objet à observer.
- Vis micrométrique
- Permet de faire une mise au point finale de l'objet à observer.
- Diaphragme
- Contrôle la quantité de lumière illuminant l'objet.
- Objectifs
- Permettent d'agrandir l'image.
En regardant dans l'oculaire, tourner lentement la vis macrométrique pour obtenir la meilleure image possible de l'échantillon.
En regardant dans l’oculaire, tourner lentement la vis micrométrique pour faire la mise au point de l’image.
Si nécessaire, changer l’objectif pour un autre dont le grossissement sera supérieur et répéter l'étape de mise au point.
Il faut faire preuve de vigilance : les objectifs ne doivent pas toucher à la platine, ni à la lame, car ils pourraient se briser.

Calcul du grossissement
Le grossissement total d’un microscope de haute puissance est calculé en multipliant le grossissement de l’objectif par celui de l’oculaire.
- Si un objectif de 10x : 10x × 10x = 100x.
- Si un objectif de 40x : 10x × 40x = 400x.
- Si un objectif de 100x : 10x × 100x = 1000x.
En général, le grossissement de l’objectif varie entre 4× et 100× et celui de l’oculaire est de 10×.
Les microscopes de haute puissance offrent un grossissement maximum de 1000×.
En raison des limites des systèmes optiques, le grossissement maximum est de 1000×. Au-delà de cette limite de grossissement, la résolution ne sera pas de qualité.
Au-delà de cette limite de grossissement en termes de résolution, on parle de grossissement vide.
Éclairage et observation
La source lumineuse des structures classiques est placée en dessous de la cible, ce qui permet d’effectuer une observation grâce à un éclairage par transmission.
Observer au microscope 4 et 10, 40, le condensateur est placé le plus proche de la lame ; si la luminosité est alors trop intense, il faut faire varier le diaphragme pour obtenir le meilleur contraste possible.
Vous êtes alors prêt à observer. Si besoin prendre en photo pour légender ou dessiner.
Les microscopes de haute puissance sont aussi connus sous le nom de microscopes biologiques. Ils servent principalement à observer des organismes.
Ils sont aussi utilisés dans l’enseignement scolaire, notamment pour observer des cellules et des microorganismes dans l’eau.
Nettoyage et rangement
- Nettoyer de nouveau l’oculaire et les objectifs à l’aide de papier à lentille prévu à cette fin.
- Remettre le plus petit objectif en place.
- Débrancher le microscope et enrouler le cordon autour de la potence.
Chaque feuille de papier ne doit être utilisée qu’une seule fois.
Une fois votre observation microscopique réalisée, n'oubliez pas de bien protéger votre microscope avec sa housse et de le nettoyer minutieusement.
Bien que le microscope soit un outil résistant, laisser son outil sans protection peut le rendre bien moins performant lors de vos futures observations au microscope.